南京世研儀器設(shè)備有限公司歡迎您,！我們是專(zhuān)業(yè)生產(chǎn)凝膠成像系統(tǒng)廠家，眾多用戶推薦品牌,歡迎選購(gòu)咨詢,！
全國(guó)服務(wù)熱線
133 7200 3365
熱點(diǎn)資訊
凝膠成像系統(tǒng)中蛋白質(zhì)電泳凝膠如何拍攝?蛋白質(zhì)凝膠電泳操作說(shuō)明
發(fā)布時(shí)間: 2021-09-23 10:17:58 來(lái)源：凝膠成像 作者：凝膠成像廠家
閱讀：
凝膠成像系統(tǒng)中Western blot是一項(xiàng)在復(fù)雜樣本中檢測(cè)蛋白質(zhì)表達(dá)水平的技術(shù)，至今已有超過(guò)40年的歷史,，并成為了蛋白質(zhì)研究中最常用的工具之一。在凝膠成像系統(tǒng)中中蛋白質(zhì)電泳凝膠如何拍攝?
在科學(xué)技術(shù)迅速發(fā)展的今天,，凝膠電泳作為非常重要的科研實(shí)驗(yàn)方法早已被廣泛應(yīng)用于蛋白和核酸的分離,。而電泳圖像的采集、保存和相關(guān)處理分析主要依靠凝膠成像系統(tǒng),。凝膠成像系統(tǒng)中Western blot是一項(xiàng)在復(fù)雜樣本中檢測(cè)蛋白質(zhì)表達(dá)水平的技術(shù),，至今已有超過(guò)40年的歷史，并成為了蛋白質(zhì)研究中最常用的工具之一,。在凝膠成像系統(tǒng)中中蛋白質(zhì)電泳凝膠如何拍攝?
蛋白質(zhì)凝膠電泳操作說(shuō)明：
1,、把上述處理的樣品按1:1(V/V)與2×SDS凝膠加樣緩沖液混合，100℃加熱3分鐘,，使蛋白質(zhì)變性;
2,、取出變性蛋白質(zhì)，立即放于冰上,。樣品如粘稠可進(jìn)行超聲對(duì)DNA進(jìn)行剪切,，以最大功率處理0.5～2分鐘應(yīng)能有效地將裂解液粘稠度降至可控水平(注意：此步驟一定要在冰上進(jìn)行);
3,、如有沉淀以10 000g將樣本4℃離心10分鐘，將上清液移至另一管中,，棄去沉淀物;
4,、計(jì)算使用Western印跡法檢測(cè)靶蛋白所需要的樣本量，一般Western印跡法技術(shù)檢測(cè)中等大小蛋白的檢出下限約為1～5ng,。在厚0.75mm的SDS聚丙烯酰胺凝膠上,，每個(gè)泳道可加樣100μg而不致過(guò)多;
5、 用玻璃微量進(jìn)樣器按順序加樣,，注意沿加樣孔底上樣,，否則樣品容易漂走。加樣量不宜過(guò)多或過(guò)少,，一般15～20ul為宜,。沒(méi)上樣的加樣孔中加1?SDS凝膠加樣緩沖液;
6、用注射器排除兩玻璃板底部的氣泡,，將電泳裝置接通電源(正極接下槽,，負(fù)極接上槽)，凝膠上所加電壓為8v/cm,當(dāng)溴酚藍(lán)前沿進(jìn)入分離膠后,，電壓可提高到15V/cm,繼續(xù)電泳直至溴酚藍(lán)到達(dá)分離膠底部(約4小時(shí)),，關(guān)閉電源;
7、從電泳裝置上卸下玻璃板,，放入一瓷盤(pán)中,，用一注射器吸取若干毫升電泳緩沖液，將針頭插入一玻璃板與凝膠之間,，小心不要將凝膠刺破,，沿玻璃板從左至右注入電泳緩沖液，將玻璃板與凝膠分開(kāi),?？拷筮吳腥ヒ唤且詷?biāo)明凝膠的位置;
8、如不需做免疫檢測(cè)可直接用考馬斯亮藍(lán)染色,。
http://qfam.cn/news-gs/304.html以上就是凝膠成像系統(tǒng)中蛋白質(zhì)電泳凝膠如何拍攝的相關(guān)介紹,，如果您還有什么疑問(wèn)，歡迎致電世研客服電話了解咨詢,。世研儀器完善的售后服務(wù),，嚴(yán)格的管理體系，良好的企業(yè)信譽(yù),，產(chǎn)品遍布全國(guó)各地,。您有興趣，可以關(guān)注更多世研其他產(chǎn)品：化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng),，純水系統(tǒng),，遠(yuǎn)程強(qiáng)聲定向系統(tǒng)等,。歡迎新老客戶來(lái)電咨詢!
相關(guān)推薦
Copyright ? 南京世研儀器設(shè)備有限公司 版權(quán)所有 蘇ICP備17064509號(hào)
南京世研儀器是專(zhuān)業(yè)的國(guó)產(chǎn)全自動(dòng)凝膠成像系統(tǒng)廠家,，提供各類(lèi)化學(xué)發(fā)光凝膠成像分析儀器，價(jià)格合理,，歡迎咨詢,！
全國(guó)服務(wù)電話：133 7200 3365 在線客服QQ：2147712637
公司地址：南京市棲霞區(qū)邁皋橋創(chuàng)業(yè)園科技研發(fā)基地寅春路18號(hào)-X588